革兰氏染色的程序和结果

革兰染色法是一种常用的细菌分类染色方法，通过以下四个步骤将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）：

1. 初染 ：

使用结晶紫染液对细菌涂片进行染色，染色时间为1分钟。

初染后，细菌被结晶紫染成紫色。

2. 媒染 ：

用碘液（碘-碘化钾溶液）覆盖涂面，染色约1分钟。

媒染后，结晶紫与碘在细菌细胞壁内形成不溶于水的复合物，使细菌更易于观察。

3. 脱色 ：

用95%的乙醇进行脱色，脱色时间约为20-30秒。

革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次较多且交联致密，遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，仍呈紫色。

革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，不含类脂，乙醇处理时会出现缝隙，结晶紫与碘复合物被洗脱，细菌呈现无色。

4. 复染 ：

使用蕃红染液或沙黄复染30秒。

复染后，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。

染色结果 ：

革兰氏阳性菌：细胞壁呈紫色。

革兰氏阴性菌：细胞壁呈红色。

通过这一系列步骤，可以在显微镜下清晰地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而进行分类和鉴定。

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